全機(jī)型通用熒光定量試劑從試劑配方優(yōu)化、預(yù)混設(shè)計(jì)以及廣泛的儀器兼容性等多方面著手,有效提升了PCR實(shí)驗(yàn)的效率,為科研工作者和實(shí)驗(yàn)人員節(jié)省了寶貴的時(shí)間,推動(dòng)了相關(guān)研究和檢測(cè)工作的快速進(jìn)展。
優(yōu)化試劑配方,加快反應(yīng)進(jìn)程
部分全機(jī)型通用熒光定量試劑通過(guò)定向優(yōu)化擴(kuò)增酶性能,能夠顯著縮短退火延伸時(shí)間。以某款試劑為例,在原有技術(shù)基礎(chǔ)上,其45個(gè)擴(kuò)增循環(huán)時(shí)間可縮短至20-30分鐘,時(shí)間節(jié)省50%以上。同時(shí),一些試劑采用了抗體修飾的AntiTaqDNA聚合酶,配合qPCRBuffer體系,不僅確保了在所有Real-TimePCR儀上進(jìn)行高靈敏的快速qPCR反應(yīng),還使得反應(yīng)時(shí)間大幅縮短。還有的試劑中添加了H-Competitor因子,能夠競(jìng)爭(zhēng)氫鍵、增強(qiáng)雙鏈的打開(kāi)強(qiáng)度,使試劑對(duì)具有復(fù)雜高級(jí)結(jié)構(gòu)的模板和長(zhǎng)片段擴(kuò)增等具有非常好的適用性,在不影響PCR效果的前提下更快獲得結(jié)果。
預(yù)混設(shè)計(jì),簡(jiǎn)化加樣操作
為減少實(shí)驗(yàn)操作量,許多全機(jī)型通用熒光定量試劑采用了預(yù)混設(shè)計(jì)。將諸如UniversalROXPassiveReferenceDye等預(yù)混入SYBRMix中,實(shí)驗(yàn)人員無(wú)需再為不同儀器調(diào)整ROX,僅需加入引物與模版即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。還有的試劑將熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶、dNTP、\(Mg^\)、SYBRGreenI、反應(yīng)緩沖液和穩(wěn)定劑等試劑預(yù)混成即用的2×Mix,使用者在進(jìn)行PCR反應(yīng)液配制時(shí),只需加入模板、引物、滅菌蒸餾水便可進(jìn)行快速Real-TimePCR反應(yīng),最大限度地減少了人為誤差、降低了污染機(jī)率,同時(shí)節(jié)約了實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間。
良好的儀器兼容性,適配多種設(shè)備
全機(jī)型通用熒光定量試劑的一大關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)就是對(duì)各類儀器的廣泛兼容性。不同品牌和型號(hào)的熒光定量PCR儀在性能和參數(shù)設(shè)置上存在差異,但這類試劑經(jīng)特殊研發(fā),其全新的通用型校正染料具有好延展性,可在多個(gè)儀器平臺(tái)上提供良好的性能表現(xiàn),無(wú)需對(duì)濃度使用進(jìn)行分別的修正過(guò)程。無(wú)論是ABI、Stratagene、Roche、Bio-Rad還是Eppendorf等各種常見(jiàn)的熒光定量PCR儀,均能適用,真正實(shí)現(xiàn)了一臺(tái)儀器適用多種機(jī)型的便捷性,避免了因儀器不同而需頻繁更換試劑或調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件的麻煩,大大提升了實(shí)驗(yàn)效率。